離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中的應用

離心濃縮儀在DNA/RNA濃縮中展現出顯著的技術優勢，成為分子生物學研究的關鍵工具。該設備通過真空負壓（50-100 mbar）降低溶劑沸點，配合溫和加熱（30-40℃）和離心力（1000-1500 rpm）三重作用，可在30-60分鐘內高效濃縮微量核酸樣品（50μL→5μL），同時保持DNA/RNA完整性（回收率≥95%）。其封閉式設計有效防止氣溶膠污染，支持96孔板高通量操作，顯著優于傳統乙醇沉淀法（節省60%時間且避免鹽分殘留）。典型應用于NGS文庫構建、PCR產物純化等場景，尤其適合珍貴樣本處理，如單細胞轉錄組測序中的cDNA濃縮。部分機型還集成冷凝捕集功能，實現有機溶劑安全回收，滿足GLP實驗室規范要求。

離心濃縮儀憑借其溫和高效的特性，已成為分子生物學實驗中核酸（DNA/RNA）濃縮純化的關鍵設備，其應用優勢及技術要點如下：

1、活性保護

• 低溫（30-40℃）真空濃縮，避免核酸高溫變性（如DNA斷裂或RNA降解）；

• 對比傳統乙醇沉淀法，回收率提升20%以上（文獻數據）；

2、高通量處理

• 單次可并行處理48-180個微量樣本（適配1.5mL離心管）；

• 自動化程序實現無人值守，節省60%操作時間；

3、兼容性廣

• 適用于各類提取緩沖液（TE buffer、Tris-HCl等）及有機溶劑（異丙醇、乙醇）；

• 可濃縮pg級至μg級核酸，滿足NGS、PCR等下游實驗需求；

以DNA濃縮為例，離心濃縮儀操作主要步驟如下：

一、實驗前準備

1、設備與耗材

○離心濃縮儀（預冷至4℃）

○1.5/2.0 mL耐有機溶劑離心管（推薦RNase/DNase-free）

○真空泵油（確保液位達標）

○冷阱

2、樣品預處理

○檢測DNA初始濃度（Nanodrop A260/A280應為1.8-2.0）

○若含高鹽（如NaCl＞200 mM），用TE buffer稀釋10倍

二、分裝與裝載

1、分裝樣品

將DNA溶液（≤1.5 mL/管）對稱裝入離心轉子，平衡誤1差＜0.1 g。

2、參數設置

三、濃縮過程監控

1、實時觀察

通過觀察窗確認無液體飛濺（若發生，立即暫停并檢查平衡），冷凝管結霜量＞50%需暫停除霜。

2、終點判斷

自動模式：儀器檢測到真空度穩定（ΔP＜5 mbar/5min）

手動模式：目測管底出現1-2 μL液滴

四、終止與回收

1、停機步驟

先關閉加熱模塊，再緩慢泄真空（速率≤10 mbar/s），最后停止離心。

2、樣品處理

立即用20 μL TE buffer重懸DNA（輕柔吹吸10次），短暫離心（1000g×30s）收集管壁殘留。

五、質量控制

1、濃度檢測

Qubit定量（比Nanodrop更準確）

瓊脂糖凝膠電泳（驗證無降解）

2、設備維護

用10%乙醇擦拭轉子及腔體

真空泵油變色（＞200小時）需更換

富睿捷真空離心濃縮設備可同時處理多個樣品，無需擔心交叉污染。系統內程序可設定至多30個，主機配備樣品在線成像系統，可在運行過程中觀察樣品濃縮狀態，并根據不同的樣品對整機的真空度進行調節。設備采用皮拉尼真空計可實時顯示腔體內的真空度，并保證真空度的真實性。根據不同的樣品可對整機轉速進行調節。